應用IMS-IFA和IMS-PCR檢測高藻水樣中的隱孢子蟲

時間：2006-11-13 來源：深圳市水務集團有限公司 作者：宗祖勝 盧益新 張金松 陶濤 劉路

資料來源：深圳市水務集團有限公司

摘　　要：檢測飲用水及其水源中的隱孢子蟲對保證飲水安全和預防隱孢子蟲病流行有非常重要的意義。本文利用直接向蒸餾水中接種卵囊的方法，對隱孢子蟲的IMS-IFA和IMS-PCR方法進行了評估，結果表明，IMS-IFA方法回收率在40%以上，精度滿足EPA1623的質控要求； IMS-PCR方法能特異性擴增Cryptosporidium parvum  18s rRNA基因序列中1056bp和435bp目標片段，巢式PCR的檢測靈敏度為10個卵囊。利用IMS-IFA和IMS-PCR方法分別對接種有卵囊的高藻水樣進行檢測，試驗發現，有幾種藻細胞對IMS-IFA干擾嚴重，從而大大增加了顯微鏡檢確認的難度；而IMS-PCR方法能從高藻水樣中檢出低密度卵囊，藻細胞沒有導致假陽性，也沒有出現PCR被抑制的現象；并且IMS-IFA和IMS-PCR兩種方法的檢測結果有較好的相關性；由此說明，IMS-PCR方法更適合用于高藻水樣中隱孢子蟲的檢測。

Abstract：

關 鍵 字：隱孢子蟲;卵囊;回收率;免疫磁珠分離;免疫熒光分析;巢式PCR